农残检测方法

1. 农残试剂配置 

缓冲溶液：取一包缓冲剂，加入500ml蒸馏水，溶解搅拌均匀，密闭、避光、阴凉处保存。显色剂：取显色剂一瓶，加入15ml缓冲溶液溶解，4℃冰箱中保存。 底物：取底物一瓶，加入15ml蒸馏水溶解，4℃冰箱中保存。乙酰胆碱酯酶：取乙酰胆碱酯酶一瓶，用3ml缓冲溶液溶解， 4℃冰箱中保存。 

注：因农残试剂生产厂家众多，使用时请以试剂说明书为准！

2. 样品处理

选取有代表性的蔬菜样品，擦掉样品表面泥土，剪成1cm见方碎片，取样品1g，放入烧杯或提取瓶中，加入5ml缓冲溶液，振荡1min～2min，倒出提取液，静置3min～5min，待用。注意：样品不可用水冲洗，应擦去表面泥土等杂物后取样。为了保证取样具有代表性，叶菜一般取来自不同植株叶片的叶尖部样本，果菜从不同个体的表皮处取样。

3. 对照溶液测试 

在提取瓶中加入2.5ml缓冲溶液，再加入100ul酶液、100ul显色剂，摇匀后于37℃放置15分钟(每批样品的控制时间必须一致)。15分钟后再加入100μL底物摇匀,此时检液开始显色反应,应立即倒入1cm比色皿，放入仪器比色池中，将仪器调到测量界面,按操作指示面板按键区的“对照”按钮，仪器开始做对照。3分钟后仪器自动对照完成，对照完成后将对照样取出，保持仪器界面不变。

注意：对照测试必须在第一通道进行，对照测试△ A应>0.3，若对照测试的结果小于以上数值时，仪器会自动提示“对照错误”，需重新做对照，以保证测量结果的准确性。

4. 样品溶液测试

另取干净的提取瓶，放入2.5ml样品提取液，加入100μl 酶液，100μl显色剂，摇匀后于37℃放置15分钟（放置的时间与对照液放置的时间必须一致）。15分钟后，再加入100μl底物摇匀，此时检液开始显色反应，应立即倒入1cm比色皿，放入仪器比色池中，按指示操作面板按键区的“测量”按钮开始测量，3分钟后仪器测量完成，显示测量结果。结果以酶被抑制的程度（抑制率）表示，当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50%时，表示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药存在，样品为阳性结果，阳性结果的样品需要重复检验2次以上。

对阳性结果的样品，可用其他方法进一步确定具体农药品种和含量。

5. 说明

葱，蒜，萝卜，韭菜，香菜，茭白，蘑菇及番茄汁液中，含有对酶有影响的植物次生物质，容易产生假阳性。处理这类样品时，可采取整株蔬菜浸提。对一些含叶绿素较高的蔬菜，也可采取整株蔬菜浸提的方法，减少色素的干扰。