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如何选择合适的培养基

丁淼-会员头像-www.biaowu.com北纳生物
丁淼 2024-12-27 19:41 评论( 0 ) 浏览( 30 )
1.常见基础的培养基有BME、MEM、DMEM、RPMI 1640、DMEM/F12等。基础营养成分包括氨基酸,是细胞合成蛋白质所必需的基础成分;维生素,在细胞的代谢过程中发挥重要作用,支持细胞的生长和功能;葡萄糖,作为细胞的主要能量来源,满足细胞在增殖过程中的能量需求;矿物质,包括钠、钾、钙、镁、磷和铁等,这些矿物质有助于维持细胞内外的离子平衡和生理功能;缓冲系统,MEM通常含有碳酸氢盐,帮助维持培养基的pH值在适宜范围(通常为7.2-7.4),以支持细胞的正常生长。
(1)BME(Basal Medium Eagle):基础Eagle培养基,由平衡盐溶液(BSS)+12种氨基酸+谷氨酰胺+8种维生素。在此基础上改良的细胞培养基品种有MEM、DMEM、IMDM等。(2)MEM(Minimum Essential Medium):在BME的基础上去除赖氨酸、生物素,增加氨基酸的浓度,适合多种细胞单层生长最基本必需培养基是一种广泛应用于细胞培养的培养基,特别适合多种哺乳动物细胞。
(3)DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's Medium) :是在BME 的基础上发展而来的,是原来各成分含量两倍。分高糖型(含葡萄糖4500mg/L)和低糖型(含葡萄糖1000mg/L)两种,高糖型适用于生长较快,附着性较差的肿瘤细胞,但是又不希望他脱离原来生长点的克隆培养,所以常用于杂交瘤技术中骨髓瘤细胞和DNA 转染的转化细胞。低糖型对于生长速度较快、附着性差的肿瘤细胞有利。其营养成分与MEM培养基相比,氨基酸的含量增加了2倍,维生素增加了4倍,同时还增加了非必须氨基酸、微量铁离子以及丙酮酸钠氨基酸。(4)RPMI 1640基础培养基:最初为培养小鼠白血病细胞而制备。开始的配方特别适合悬浮细胞的生长,主要针对淋巴细胞。其组成较为简单,但是,正是因为其简单,才可以适应很多种类细胞的生长,适合多种哺乳动物细胞。特别是主要用于一些悬浮细胞培养以及人类白血病细胞的单层培养。其营养成分包括含有还原剂谷胱甘肽、高浓度的维生素,生物素,维生素B12。
(5)DMEM/F12培养基:将DMEM与Ham's F12培养基以1:1比例混合改良而来的。改良得到的DMEM/F12培养基,营养成分更为丰富,含有更多种微量元素,广泛应用于多种哺乳类细胞的培养,也适用于低血清含量下哺乳动物细胞的培养以及克隆密度培养。作为开发无血清配方的基础,以利用F12含有较丰富的成分和DMEM含有较高浓度的营养成分为优点。已在DMEM/F12之中成功培养的细胞包括MDCK、胶质细胞、成纤维细胞、人内皮细胞及小鼠成纤维细胞。
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