茶黄素的分离纯化

1、柱层析法

Roberts E A H首先应用双向纸层析发现茶黄素，已经进行了许多茶黄素的提取和分离纯化的研究。Crispin D J等用Sephadex LH-20柱层析，采用丙酮梯度洗脱分离红茶中的茶黄素，分离出3个峰，达到分离纯化的效果。竹尾忠一应用Sephadex LH-20将红茶水浸出物进行柱层析分离，以体积分数30％、40％、50％的丙酮顺序梯度洗脱，茶黄素和其他色素达到有效分离。CollierP．D等应用两种方法，即Sephadex LH-20柱色谱＋硅胶柱色谱和Sephadex LH-20柱色谱，均分离出5种茶黄素组分。

丁阳平等利用聚酰胺分离茶黄素，最佳分离条件为：上样质量分数为500mg/50dL聚酰胺，上样质量分数为20％，洗脱剂为甲醇∶氯仿∶丙酮∶冰醋酸（体积比为3∶5∶8∶0.5），采用等度洗脱，流速为0.6BV/h，分离得到茶黄素和茶黄素-3′-没食子酸酯两组分，含量分别为93％和85％。Wang K B等用聚酰胺薄板采用不同的展开剂实现了儿茶素（DL-C），?表儿茶素（EC），表没食子儿茶素（EGC），表儿茶素没食子酸酯（ECG），表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG），茶黄素（TF1）、茶黄素-3-没食子酸酯（TF2A）、茶黄素-3′-没食子酸酯（TF2B）和茶黄素双没食子酸酯（TF3）9种成分的有效分离。

2、高速逆流色谱法

Yanagida A等用高速逆流色谱（HSCCC）对茶叶中的儿茶素和食品相关的多酚进行了分离分析，溶剂体系为叔丁醇-乙酸乙酯-乙腈和三氯乙酸，以上相有机溶剂为流动相，下相为固定相，流速为2mL/min。结果表明单聚合儿茶素以及它们的没食子酸酯和咖啡碱为半发酵绿茶中的主要成分。此外，疏水性的茶黄素和极性的茶红素也被检测分离出。

Wang K等用高速逆流色谱分离纯化茶黄素和儿茶素，采用V（正己烷）∶V（乙酸乙酯）∶V（甲醇）∶V（水）∶V（乙酸）＝1∶5∶1∶5∶0.25溶剂体系，下相为流动相，流量为2mL/min?转速为700r/min，可以从红茶或茶黄素粗提取物中成功分离4种主要的茶黄素单体，用相同的溶剂体系也可以将表没食子儿茶素没食子酸酯，没食子儿茶素没食子酸酯，表儿茶素没食子酸酯和表没食子儿茶素从绿茶中成功分离。