粘质沙雷氏菌标准物质

Serratia marcescens Reference Material

    粘质沙雷氏菌是一种传统的空气生物学模式菌，具有培养周期短、雾化和冲击耐受性好、易消毒处理等优点，因此被作为生物防护评价的指示菌。粘质沙雷氏菌标准物质主要用于生物安全柜人员、产品和交叉污染保护性能以及生物防护口罩、生物防护服等其它生物防护设备的性能评价测量结果的溯源、测量质量控制以及相关方法确认与评价。

一、 样品制备

    选取粘质沙雷氏菌（Serratia marcescens）标准菌株（ATCC，菌株编号 8039）经过划线、活化、 扩大培养后，用高速冷冻离心机离心收集粘质沙雷氏菌。制备一定浓度的菌匀液，与冻干保护剂混匀，用移液器分装至 2 mL 棕色西林瓶中，冻干后充氮气压盖密封。

二、 溯源性及定值方法 

    本标准物质由多家实验室采用营养琼脂涂布平板法进行合作定值。定值测量程序参考国际标准化组织发布的参考测量程序 UNE-EN-ISO 4833-2，是通过对标准物质样品进行 10 倍系列稀释，并涂布于营养琼脂上进行培养，选择可以计数的稀释度平板上的菌落数进行计数，采用公式计算得到活菌浓度，其量值单位是 CFU/mL（CFU，菌落形成单位 Colony-Forming Units）。通过使用经确认的 测量程序和经检定/校准的质量、容量计量器具，确保标准物质特性量值的溯源性。

三、 特性量值及不确定度

    粘质沙雷氏菌标准物质的不确定度评定中考虑了测量精密度、移液器、稀释因子等引入的不确定度分量，以及标准物质不均匀性和不稳定性引入的不确定度分量。

四、 均匀性及稳定性评估

    参照 JJF1343 国家计量技术规范（等效 ISO 指南 35），采用营养琼脂涂布平板法，按照随机抽样原则对样品进行均匀性评估，方差分析结果表明，样品均匀性良好；采用相同测量方法，按照密后疏的原则对样品进行稳定性评估，趋势分析结果表明，-20℃下可以长期稳定保存，4 ℃下可以稳定保存 7 天，因此，标准物质应贮存在-20 ℃下；建议干冰运输，运输时限不超过 4 天。

    该标准物质自定值之日起，有效期为 6 个月。

五、 包装、贮存及使用

    1. 包装与保存：本标准物质采用 2 mL 棕色西林瓶包装；采用干冰方式运输，收到后置于-20℃温度下冷冻保存。

    2. 使用：本标准物质开瓶后应当一次性完全使用，每个单元标准物质作为独立检测单元，无需再称量取样。考虑到环境温度和湿度的影响，从-20 ℃温度下取出标准物质自然平衡至室温后启封并加入 2 mL 磷酸盐缓冲液复水后充分混匀，然后根据实验需要稀释到合适浓度尽快使用。