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Illumina 平台高通量测序 DNA 文库定量标准物质
Reference material of DNA library quantification for next generation sequencing
Illumina 平台高通量测序 DNA 文库定量系列标准物质作为测量标准用于 illumina 高通量测序平台的 DNA 文库定量测量和实验室质量控制等领域。
一、样品制备
本系列标准物质是将大肠杆菌基因组 DNA 随机打断、构建文库后得到的平均长度主要为 355bp 的 DNA 片段,稀释至一系列浓度后进行分装。
二、溯源性及定值方法
该标准物质采用数字 PCR 方法对高通量测序 DNA 文库定量标准物质的目标基因片段的拷贝数进行测 定,作为标准物质的标准值。本系列标准物质通过使用满足计量学特性要求的制备方法、测量方法和计量 器具,保证其量值溯源性。
三、特性量值及不确定度
编号 |
名 称 |
摩尔浓度(pM) |
扩展不确定度(%)
(k=2) |
NIM-RM4034-1 |
Illumina 平台高通量测序 DNA 文库定量标准物质 |
57.8 |
13 |
NIM-RM4034-2 |
6.14 |
13 |
|
NIM-RM4034-3 |
0.68 |
13 |
|
NIM-RM4034-4 |
0.0627 |
13 |
|
NIM-RM4034-5 |
0.00721 |
11 |
标准值不确定度评定考虑了定值方法、均匀性、稳定性引入的不确定度分量。
四、均匀性检验及稳定性考察
按照 JJF1343-2012《标准物质定值的通用原则及统计学原理》要求,采用实时荧光定量 PCR 方法对该 标准物质进行均匀性检验研究,最小取样量 5μL,结果表明均匀性良好。按照先密后疏的原则采用数字 PCR 方法对该标准物质进行稳定性考察研究,标准值无方向性变化并通过平均值一致性检验,表明稳定性良好。
本标准物质自定值日期起,有效期至 2021 年 4 月,研制单位将继续跟踪监测该标准物质的稳定性,有 效期内如发现量值变化,将及时通知用户。
五、包装、储存及使用
1.包装与储存:本标准物质采用 1.5mL 立式拧口塑料离心管包装,200μL/瓶。建议-70?C低温长期保存。
2.使用注意事项:使用前应先从冰箱内取出,平衡至室温后离心再打开瓶盖使用。样品开封后,应尽快 恢复密封状态。
3.使用建议:使用本标准物质制作标准曲线时,每个浓度水平的标准物质最小取样量 5μL,然后再采用 荧光定量 PCR 进行检测。
声明
1.本标准物质仅供实验室研究与分析测试工作使用。因用户使用或储存不当所引起的投诉,不予承担责任。
2.收到后请立即核对品种、数量和包装,相关赔偿只限于标准物质本身,不涉及其他任何损失。
3.仅对加盖“中国计量科学研究院标准物质专用章”的完整证书负责。请妥善保管此证书。
4.如需获得更多与应用有关的信息,请与技术咨询部门联系。
注:以上信息仅供参考,以产品附带证书为准。
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